Kaip veikia „Western Blot“ ŽIV testas

Posted on
Autorius: Joan Hall
Kūrybos Data: 4 Sausio Mėn 2021
Atnaujinimo Data: 21 Lapkričio Mėn 2024
Anonim
Western blot | Western blotting protocol | Application of Western Blot | Limitations of Western blot
Video.: Western blot | Western blotting protocol | Application of Western Blot | Limitations of Western blot

Turinys

ŽIV testavimas paprastai yra daugiapakopis procesas. Pirmasis naudojamas testas paprastai yra didelio jautrumo testas. Didelio jautrumo testai skirti nustatyti kuo daugiau galimų ŽIV infekcijų. Po to po pirmojo testo atliekamas vienas ar keli labai specifiniai testai, siekiant atmesti galimai klaidingai teigiamą ŽIV diagnozę. Istoriškai dažniausiai iš labai specifinių bandymų, naudojamų patvirtinant tyrimą, yra Western blot testas. Tačiau yra ir kitų patvirtinamųjų testų, kuriems dabar teikiama pirmenybė. „Western blot“ buvo pašalintas iš Ligos kontrolės ir prevencijos centro rekomenduoto laboratorinio ŽIV tyrimo algoritmo 2014 m. Ketvirtosios kartos antikūnų / antigenų testų naudojimui patvirtinti teigiamą pradinį atrankos testą.

Kaip veikia „Western Blot“ testas?

Western blot testai taip pat žinomi kaip baltymų imunoblotai. Šie testai naudojami mėginyje nustatyti specifinius baltymus. Pagrindinė Western blot technika apima baltymų rūšiavimą pagal ilgį ant gelio. Tada tas tinklelis tiriamas antikūnais, kurie reaguoja į specifinius baltymus, kurių ieškoma.


Tačiau kai Western blot bandymai naudojami ŽIV tyrimams, šis procesas iš tikrųjų atliekamas atvirkščiai. Paprastai atliekant Western blot testą, nežinomų baltymų ieškoma naudojant žinomus antikūnus. Tačiau atlikdami ŽIV Western blot testą mokslininkai dirba su paruoštais ŽIV baltymų mėginiais ir ieško, ar žmogaus kraujyje nėra ant jų prilipusių antikūnų.

Western blot ŽIV testai paprastai ieško antikūnų prieš šiuos ŽIV baltymus:

  • Baltymai iš ŽIV apvalkalo: gp41 ir gp120 / gp160.
  • Baltymai iš viruso šerdies: p17, p24, p55
  • Fermentai, kuriuos ŽIV naudoja infekcijos procese: p31, p51, p66

Kad asmuo būtų laikomas ŽIV užsikrėtusiu, jis turi turėti antikūnų prieš vieną iš apvalkalo baltymų ir vienas iš pagrindinių baltymų arba prieš vieną iš fermentų. Jei asmuo turi antikūnų, kurie yra prieš kitokį baltymų derinį, jų rezultatai paprastai laikomi neapibrėžtais. Tikslus rezultato paskelbimo neapibrėžtu algoritmas skiriasi kiekvienam konkrečiam Western blot testui. Tačiau visada siekiama sumažinti klaidingai teigiamo testo, kuris ką nors be priežasties sujaudina, riziką.


Neapibrėžti Western blot rezultatai gali būti naujos ŽIV infekcijos požymis. Šie bandymų rezultatai taip pat gali pasireikšti, kai asmenys buvo paveikti ar užkrėsti kitais retrovirusais, pavyzdžiui, HTLV. Paprastai, jei asmuo, kuriam nustatytas neapibrėžtas Western blot ŽIV testas, iš tikrųjų yra ŽIV teigiamas, praėjus daugiau laiko, jo Western blot testas taps aiškiai teigiamas.

Western blot testai naudojami kaip patvirtinamieji, o ne kaip pirminiai testai, nes jie yra mažiau jautrūs nei pirmojo etapo ELISA testai ar RNR aptikimo testai. Tai reiškia, kad jie rečiau nustato infekciją. Tačiau Western blot testai taip pat rečiau duoda klaidingai teigiamą testo rezultatą, kai naudojami patvirtinant pradinį teigiamą testą.

Jei jums buvo pasakyta, turite atlikti neapibrėžtą Western Blot testą

Pasakymas, kad Western blot testas yra neterminuotas, gali sukelti didelį stresą žmonėms, kuriems atliekami ŽIV testai. Yra keletas priežasčių nesusiję su ŽIV poveikiu tai gali sukelti tokį rezultatą.Tačiau žmonėms, turintiems neapibrėžtus Western blot, paprastai rekomenduojama pakartotinai atlikti tyrimą iškart arba praėjus tam tikram laikui.


Neatidėliotinas pakartotinis patikrinimas, ar nebuvo bloko „Western blot“ vykdymo procese. Priešingai, palaukus mėnesį ar daugiau prieš pakartotinį tyrimą, žmogaus imuninė sistema gali sugaišti papildomus antikūnus prieš ŽIV antigenus, jei jie iš tikrųjų buvo užsikrėtę ŽIV.

Pakartotinai atlikus neapibrėžtą Western blot testą, rezultatas bus aiškiai teigiamas arba neigiamas. Tačiau jei pakartotiniai tyrimai ir toliau siunčia painius signalus, gydytojams gali tekti pereiti prie kitų metodų nustatant, ar turite ŽIV infekciją. Nė vienas ŽIV testas nėra idealus kiekvienoje situacijoje.